pcr實(shi)驗室建設的(de)要求

什么是pcr實驗室(shi)建(jian)設(she)的基本要求？

一、pcr實驗室(shi)建設(she)的平面布置。

PCR擴(kuo)增檢(jian)測實(shi)驗(yan)室原(yuan)則(ze)上分(fen)為(wei)四個獨立的(de)工(gong)作區：試劑儲(chu)存(cun)(cun)區及(ji)備(bei)用區，標(biao)本制(zhi)(zhi)備(bei)區，擴(kuo)增反應混(hun)合物配制(zhi)(zhi)及(ji)擴(kuo)增區。產物分(fen)析(xi)區。為(wei)了防(fang)止交叉污染，各工(gong)作區域(yu)在進入時(shi)都是(shi)嚴格按(an)照單一的(de)方向進行(xing)的(de)，即只有試劑儲(chu)存(cun)(cun)區和(he)(he)準(zhun)備(bei)區→樣品(pin)制(zhi)(zhi)備(bei)→擴(kuo)增反應混(hun)合物的(de)配制(zhi)(zhi)和(he)(he)擴(kuo)增產物分(fen)析(xi)區。在實(shi)驗(yan)區域(yu)間，應采用傳送窗將(jiang)試劑和(he)(he)樣品(pin)傳送。

二(er)、實(shi)驗室的(de)空調和(he)通風系統和(he)壓力控制設計。

pcr實(shi)驗室(shi)建設沒有嚴格的凈化要求，但為了避免各試驗區之間可能出現交叉污染，建議采用全送全排氣流組織。與此同時，應嚴格控制送、排風量，保證各試驗區域的壓力要求。

1.樣品準(zhun)備區域。

在(zai)這一地區主要進(jin)行(xing)的(de)(de)操(cao)作是(shi)保(bao)存(cun)樣(yang)品.核酸(RNA.DNA)提取，儲(chu)存(cun)，儲(chu)存(cun)，添(tian)加(jia)到擴增(zeng)反應管，檢(jian)測DNA合成。該地區的(de)(de)壓(ya)力梯度(du)要求是(shi)：對相(xiang)鄰(lin)區域進(jin)行(xing)正壓(ya)，以避免相(xiang)鄰(lin)區域內(nei)空(kong)氣(qi)中(zhong)污染物(wu)的(de)(de)進(jin)入。此外(wai)，由(you)于(yu)氣(qi)溶膠對環(huan)境(jing)的(de)(de)污染，在(zai)加(jia)樣(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong)應盡量(liang)避免對環(huan)境(jing)造成不(bu)必要的(de)(de)污染。

2.試劑(ji)儲藏和準備區域。

在實(shi)驗(yan)區(qu)域內(nei)(nei)，主要(yao)進行了試劑(ji)的(de)(de)(de)配(pei)制(zhi)、試劑(ji)的(de)(de)(de)分裝、主反(fan)應混合物的(de)(de)(de)制(zhi)備。試樣所用的(de)(de)(de)試劑(ji)和物料(liao)必須(xu)直(zhi)接(jie)運到區(qu)內(nei)(nei)，不能通過其它(ta)區(qu)域。在本區(qu)儲存試劑(ji)原料(liao)，并(bing)在本區(qu)內(nei)(nei)配(pei)制(zhi)成所需(xu)儲存試劑(ji)。對于風壓的(de)(de)(de)控制(zhi)，本地(di)區(qu)并(bing)無嚴格的(de)(de)(de)要(yao)求(qiu)。

3.產物分析的擴(kuo)展領域。

在這一地(di)區，主(zhu)要是對擴(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)片段的(de)測(ce)定。該地(di)區是主(zhu)要的(de)擴(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)產(chan)物污染源，因此該地(di)區要求(qiu)壓力(li)梯(ti)度(du)為負，以避免該地(di)區擴(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)產(chan)物從(cong)該地(di)區擴(kuo)(kuo)散到(dao)其(qi)他地(di)區。

4.反應(ying)混合物(wu)的(de)調(diao)配(pei)和擴展區域。

在(zai)這一地區(qu)主要進行的(de)(de)(de)(de)是DNA擴增。另外，該區(qu)還(huan)可以將制備(bei)的(de)(de)(de)(de)DNA模板(樣品處理區(qu))和主反(fan)應混(hun)合(he)(he)液(ye)(試(shi)劑(ji)貯藏和準備(bei)區(qu))制備(bei)為反(fan)應混(hun)合(he)(he)液(ye)，等等。本(ben)地區(qu)的(de)(de)(de)(de)壓力梯度(du)要求是：在(zai)本(ben)區(qu)域內，采用(yong)負(fu)壓方(fang)式，避免本(ben)地區(qu)氣(qi)溶膠泄漏。應盡量減少因(yin)氣(qi)霧(wu)劑(ji)造成(cheng)的(de)(de)(de)(de)污(wu)染而不(bu)必(bi)要的(de)(de)(de)(de)出行。